一、试剂介绍

Alkyne Tyramide 是一个非常强大且应用广泛的工具，尤其在信号放大技术和超高灵敏度检测领域扮演着核心角色。它是经典酪胺信号放大技术与现代点击化学相结合的产物。

1. 超高灵敏度免疫检测

这是Alkyne tyramide最经典、最广泛的应用领域。

实验技术： 免疫组织化学、免疫细胞化学、蛋白质印迹。

解决的核心问题： 当目标蛋白表达量极低时，传统方法信号微弱或无信号。

研究场景举例：

低丰度信号分子检测： 如细胞因子、磷酸化蛋白、转录因子等。

稀有细胞类型鉴定： 如干细胞、循环肿瘤细胞、特定神经元亚型。

微小病灶或早期病变标志物检测： 在癌症早期诊断或神经退行性疾病早期标志物研究中。

优势： 与传统HRP-DAB方法或直接荧光法相比，灵敏度可提高10至1000倍。

2. 多重免疫荧光标记

这是Alkyne tyramide的“杀手级”应用，解决了免疫荧光中的一个重大技术瓶颈。

解决的核心问题： 在同一张组织切片或细胞爬片上，使用来源于同一种属的多种一抗（例如，全部是小鼠来源的抗体）进行标记。

研究场景举例：

肿瘤微环境研究： 同时标记肿瘤细胞、免疫细胞、基质细胞等多种成分，分析其空间分布和相互作用。

神经环路解析： 同时标记不同种类的神经元、星形胶质细胞及突触标志物。

免疫细胞分型： 在复杂浸润中精确区分T细胞、B细胞、巨噬细胞等亚群。

工作流程（以两轮为例）：

第一轮标记： 小鼠抗蛋白A → HRP标记的二抗 → Alkyne tyramide → 点击连接 荧光染料A。

HRP灭活： 通过加热或H₂O₂处理，彻底灭活第一轮中的HRP。

第二轮标记： 小鼠抗蛋白B → HRP标记的二抗 → Alkyne tyramide → 点击连接 荧光染料B。

如此循环，可实现5-7色甚至更多重标记。

3. 原位杂交的信号放大

用于检测低丰度的核酸序列。

实验技术： 荧光原位杂交、RNAscope。

解决的核心问题： 检测低拷贝数的mRNA、长链非编码RNA或病毒RNA。

研究场景举例：

基因表达空间定位： 精确观察特定基因在组织或胚胎中的表达位置。

病原体检测： 检测细胞内潜伏的病毒基因组。

单细胞转录组学验证： 对单细胞测序发现的稀有转录本进行空间定位验证。

4. 蛋白质印迹的超灵敏检测

解决的核心问题： 检测样品量极少或表达量极低的蛋白质。

优势： 比传统的化学发光法灵敏度高出数个数量级。

二、试剂属性

中文名称：炔烃 酪酰胺

英文名称：Alkyne tyramide，N-[2-(4-Hydroxyphenyl)ethyl]-4-pentynamide

N-(4-Hydroxyphenethyl)pent-4-ynamide

CAS：1694495-59-4

分子式：C13H15NO2

分子量：217.27

纯度：≥95%

外观：固体

品牌：陕西新研博美生物科技有限公司

溶解性：常溶于 DMSO,DMF

储存条件：建议在-20℃下干燥、避光保存，并尽量避免频繁解冻冻融，现配现用为佳

规格：1mg，5mg，10mg

结构式：

三、相关试剂

Biotin-PEG4-Amine-C6-Azide，生物素-四聚乙二醇-氨基-C6-叠氮

Desthiobiotin-C4-oxyamine，脱硫生物素-C4-羟胺

Biotinyl Cystamine，生物素半胱胺

Biotin-PEG3-SCO-PPh3，生物素-三聚乙二醇-SCO-PPh3

Biotin-C3-PEG3-C3-NH2，生物素-C3-三聚乙二醇-C3-氨基

Bis-PEG13-NHS ester

Bis-PE21 NHS ester

Bis-PEG4-NHS ester

Bis-PEG2-NHS ester

Bis-PEG5-NHS ester

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该试剂只用于科研实验，不能用于人体。